Microscopie optique
Colorations histologiques
Coloration de coupes fines (4-20 µm) permettant la visualisation en microscopie optique en champ clair de structures cellulaires et tissulaires
Hémalun (noyaux), Eosine (cytoplasme), Bleu Alcyan (mucus), Red Oil (lipides), ….
Immunohistochimie
Cette technique permet de visualiser des molécules spécifiques dans des cellules ou des coupes fines (4-20 µm) de tissus. Les molécules d’intérêt sont marquées avec des anticorps spécifiques et le marquage est révélé grâce à l’enzyme HRP (Horseraddish peroxidase) qui, en présence de Di-amino-benzidine (DAB) produit un précipité noir aisément localisable en microscopie optique en champ clair.
Marquage indirect : Anticorps Primaire → Anticorps Secondaire – HRP → Révélation DAB
Marquage indirect amplifié : Anticorps Primaire → Anticorps Secondaire Biotinylé → Streptavidine-HRP (complexe ABC) → Révélation DAB
Immunofluorescence
Cette technique permet de visualiser des molécules spécifiques dans des cellules ou des coupes fines (4-20 µm) ou épaisses (20-100 µm) de tissus. Les molécules d’intérêt sont marquées avec des anticorps spécifiques et le marquage est révélé par fluorescence par microscopie de fluorescence en champ large (coupes fines) ou en microscopie confocale (coupes épaisses).
Marquage direct : Anticorps Primaire couplé à un fluorophore
Marquage indirect : Anticorps Primaire → Anticorps Secondaire couplé à un fluorophore
Marquage indirect amplifié : Anticorps Primaire → Anticorps Secondaire biotinylé → Streptavidine couplé à un fluorophore
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